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活細(xì)胞存在于動(dòng)態(tài)的生理環(huán)境中,并受到各種各樣的機(jī)械刺激。 例如,心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和骨細(xì)胞等細(xì)胞類(lèi)型經(jīng)常被拉伸或壓縮。 細(xì)胞通過(guò)被稱(chēng)為機(jī)械感受器的受體和通道來(lái)探測(cè)它們的機(jī)械環(huán)境。 它們通過(guò)改變黏附、增殖、運(yùn)動(dòng)、形態(tài)和合成特性對(duì)這些刺激作出相應(yīng)的反應(yīng)。 然而,在標(biāo)準(zhǔn)體外條件下,沒(méi)有一個(gè)刺激物在生活環(huán)境中可被復(fù)制用于分析。日本 STREX公司開(kāi)發(fā)的細(xì)胞應(yīng)力拉伸儀可以機(jī)械地通過(guò)拉伸和壓縮來(lái)刺激培養(yǎng)中生長(zhǎng)的細(xì)胞。 這是通過(guò)將細(xì)胞粘附到我們獨(dú)特的PDMS拉伸室,并使它們承受機(jī)械應(yīng)變,同時(shí)能夠在培養(yǎng)箱中進(jìn)行觀察。 Strex有兩種主要類(lèi)型的設(shè)備,分為高通量、長(zhǎng)期拉伸模型和可用于活細(xì)胞成像的顯微鏡安裝選項(xiàng)。
特點(diǎn):
1. 均勻載荷:每個(gè)細(xì)胞在拉伸軸上承受的應(yīng)變幾乎是均勻的(變異性小于5%),確保了實(shí)驗(yàn)的高重復(fù)性。 而在非軸向,二次荷載則弱得多。
2. 高重現(xiàn)性:高精度, 高扭矩步進(jìn)電機(jī)在拉伸單元允許一致的運(yùn)動(dòng)范圍在各種速度和拉伸比。 這種運(yùn)動(dòng)穩(wěn)定性,結(jié)合有機(jī)硅膜腔的優(yōu)越特性,產(chǎn)生了機(jī)械拉伸,無(wú)論拉伸速度或距離,都具有高度的可重復(fù)性。
3. 廣泛的拉伸模式: 該系統(tǒng)可以配置8個(gè)不同的拉伸比率(所需的拉伸程度)和8個(gè)拉伸運(yùn)動(dòng)頻率。 這就產(chǎn)生了64種預(yù)先設(shè)定好的拉伸模式。 定制模式與高速或拉伸比率會(huì)造成在額外的成本。
4. 獨(dú)特的拉伸室: PDMS室是專(zhuān)門(mén)為STREX機(jī)器開(kāi)發(fā)的,由硅樹(shù)脂薄膜制成,便于各種實(shí)驗(yàn)室分析技術(shù),包括細(xì)胞固定和熒光成像。
如何工作呢?
細(xì)胞外基質(zhì)涂層,如纖維連接蛋白或膠原蛋白應(yīng)用于拉伸室,促進(jìn)細(xì)胞粘附,促進(jìn)細(xì)胞無(wú)縫培養(yǎng)。 粘附的細(xì)胞被拉伸和壓縮。 安裝在顯微鏡平臺(tái)上的系統(tǒng)版本能夠?qū)崟r(shí)觀察細(xì)胞對(duì)這些施加的應(yīng)力負(fù)載的反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)概述
1. 細(xì)胞被播種到一個(gè)拉伸腔室,該腔室用細(xì)胞外基質(zhì)涂層預(yù)處理。
2. 細(xì)胞粘附在拉伸室,過(guò)夜培養(yǎng)過(guò)程開(kāi)始。
3. 細(xì)胞增殖后,選擇拉伸模式,開(kāi)始周期。 按所選拉伸模式的指定拉伸單元格。
4. 進(jìn)行細(xì)胞觀察。 (如果使用顯微鏡貼裝版,可在顯微鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞)
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的來(lái)收集/處理細(xì)胞。