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活細(xì)胞存在于動態(tài)的生理環(huán)境中,并受到各種各樣的機械刺激。 例如,心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和骨細(xì)胞等細(xì)胞類型經(jīng)常被拉伸或壓縮。 細(xì)胞通過被稱為機械感受器的受體和通道來探測它們的機械環(huán)境。 它們通過改變黏附、增殖、運動、形態(tài)和合成特性對這些刺激作出相應(yīng)的反應(yīng)。 然而,在標(biāo)準(zhǔn)體外條件下,沒有一個刺激物在生活環(huán)境中可被復(fù)制用于分析。日本 STREX公司開發(fā)的細(xì)胞應(yīng)力拉伸儀可以機械地通過拉伸和壓縮來刺激培養(yǎng)中生長的細(xì)胞。 這是通過將細(xì)胞粘附到我們獨特的PDMS拉伸室,并使它們承受機械應(yīng)變,同時能夠在培養(yǎng)箱中進行觀察。 Strex有兩種主要類型的設(shè)備,分為高通量、長期拉伸模型和可用于活細(xì)胞成像的顯微鏡安裝選項。
特點:
1. 均勻載荷:每個細(xì)胞在拉伸軸上承受的應(yīng)變幾乎是均勻的(變異性小于5%),確保了實驗的高重復(fù)性。 而在非軸向,二次荷載則弱得多。
2. 高重現(xiàn)性:高精度, 高扭矩步進電機在拉伸單元允許一致的運動范圍在各種速度和拉伸比。 這種運動穩(wěn)定性,結(jié)合有機硅膜腔的優(yōu)越特性,產(chǎn)生了機械拉伸,無論拉伸速度或距離,都具有高度的可重復(fù)性。
3. 廣泛的拉伸模式: 該系統(tǒng)可以配置8個不同的拉伸比率(所需的拉伸程度)和8個拉伸運動頻率。 這就產(chǎn)生了64種預(yù)先設(shè)定好的拉伸模式。 定制模式與高速或拉伸比率會造成在額外的成本。
4. 獨特的拉伸室: PDMS室是專門為STREX機器開發(fā)的,由硅樹脂薄膜制成,便于各種實驗室分析技術(shù),包括細(xì)胞固定和熒光成像。
如何工作呢?
細(xì)胞外基質(zhì)涂層,如纖維連接蛋白或膠原蛋白應(yīng)用于拉伸室,促進細(xì)胞粘附,促進細(xì)胞無縫培養(yǎng)。 粘附的細(xì)胞被拉伸和壓縮。 安裝在顯微鏡平臺上的系統(tǒng)版本能夠?qū)崟r觀察細(xì)胞對這些施加的應(yīng)力負(fù)載的反應(yīng)。
實驗概述
1. 細(xì)胞被播種到一個拉伸腔室,該腔室用細(xì)胞外基質(zhì)涂層預(yù)處理。
2. 細(xì)胞粘附在拉伸室,過夜培養(yǎng)過程開始。
3. 細(xì)胞增殖后,選擇拉伸模式,開始周期。 按所選拉伸模式的指定拉伸單元格。
4. 進行細(xì)胞觀察。 (如果使用顯微鏡貼裝版,可在顯微鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞)
5. 根據(jù)實驗的目的來收集/處理細(xì)胞。